PCR實驗室又稱基因擴增實驗室。是一種分子生物學技術,可用于放大特定的DNA片段,可看成生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能夠迅速掌握患者體內的病毒含量,其精準度高達納米級別,檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、為提供了可靠的檢驗依據。大量用于疾病的診斷和任何有DNA,RNA的地方,又稱無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術。下面品美裝飾帶您了解PCR實驗室設計中有哪些細節是不可忽略的相關信息:
一、PCR實驗室設計不可忽視的細節
1.設計時需要按功能間來建設,試劑配置/存儲區、樣品的處理區、核酸的擴增區、還有就是產品分析區,每個區都分開來操作,區與區之間物品的傳遞通過傳遞窗,進行殺菌處理,而人每去到一個區,都需要經過緩沖間,風淋室吹淋后,方可通過。
2.在整個實驗的過程中,試劑和樣品很容易受到氣溶膠的污染,所以每個區需要規劃一個緩沖間,通過氣壓的調節,使氣溶膠不易泄露到另一個功能間,以確保實驗室的安全性。
3.實驗室區域的設計流程,進入需要在潔凈區更換潔凈服,進入緩沖室,再到污染實驗區,離開時,污染實驗區需要在緩沖室到沐浴間,后再到清潔區,以防止交叉污染。
4.防止樣品之間的交叉污染,設計時功能間需要凈化控制,常見為10萬級,緩沖間設計為正壓區,以確保與外面隔離,也防止相鄰房間的氣溶膠進入樣品間對其進行污染。
5.PCR實驗過程中,從試劑的準備到樣品的處理,核酸的擴增還有樣品的分析,在此過程中,如果有需要粉碎的,則應增加樣品粉碎。
6.通風系統需要調整換氣的次數、排風與送風形式、房間壓差、控制系統。
7.自控系統主要的功能是調節與控制,如果沒有完善的自控系統,那么很難應對突發情況,也無法確保壓力梯度在合理的范圍內。
8.備用電源是不可少的,以便應對突然斷電的問題,此外,還要重視排風機的備用問題,以確保正負壓在合理的范圍內。
二、PCR實驗室壓差的設計
1.潔凈室內設計成負壓,通過控制后,使得實驗過程中的試劑和樣品免受氣溶膠的污染,也可以降低核酸擴增物對人員和環境的污染。
2.實驗室與非潔凈區之間則應保持正壓>10Pa,氣流的方向是準備區空氣流向閘間,標本制備區流向閘間,而擴增區氣流方向由閘間流向擴增區。
3.按照試劑單向流方向,各個實驗室之間設計不同壓力梯度來實現單向氣流組織方向,由試劑準備區(+20Pa)、標本制備區(+15Pa)、擴增反應一區(-5Pa)、純化區(-10Pa)、擴增反應二區(-20Pa)、到后純化區(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負壓壓力梯度。
三、PCR實驗室安全設施
1.潔凈室的空調系統,采用直流系統不回風,防止交叉污染。
2.試劑準備間設有超凈工作臺,免受空氣環境污染;標本制備間配有生物安全柜,確保標本不污染室內環境。